Desarrollo de RT-PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa con Transcriptasa Inversa del inglés Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction) para la detección y tipificación de virus del dengue. Avances de investigación.

Resumen

En la actualidad el dengue es la segunda enfermedad más importante de las transmitidas por artrópodos que afectan al ser humano, después de la malaria. Se estima que la tasa de infección en el mundo es de más de 100 millones de individuos al año, de los cuales 500,000 desarrollan las manifestaciones clínicas más severas. Más de 100 países han informado de la presencia de esta enfermedad en su territorio. El diagnóstico de laboratorio es esencial para la confirmación del dengue, éste incluye técnicas de aislamiento e identificación del virus, de diagnóstico serológico y de biología molecular. La detección de antígenos virales en sueros virémicos es necesaria para las investigaciones clínicas y epidemiológicas y debe realizarse rápidamente para implantar tempranamente el tratamiento anti-choque a los enfermos y para la detección precoz de un brote.
Objetivo: Con el presente estudio se pretendió determinar la presencia de dengue y sus sero-variedades en pacientes de la red hospitalaria del Instituto de Salud del Estado de México.
Material y métodos: Se colectó suero y sangre completa de los pacientes en las unidades hospitalarias de referencia y estas se remitieron en un lapso menor a 72 horas posteriores a la toma al Laboratorio Estatal de Salud Pública del ISEM. El RNA viral se extrajo a partir de las muestras de sangre completa.
Resultados: Los resultados obtenidos mediante RT-PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa con Transcriptasa Inversa del inglés Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction) se compararon con los resultados oficiales emitidos al SINAVE (Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica). Las muestras que resultaron positivas a dengue por RT-PCR se cultivaron en células VERO, después de 7 días se analizaron de nuevo por RT-PCR y se confirmo el resultado, siendo todas positivas.
Conclusión: La detección del virus del dengue por RT-PCR con los iniciadores IRVQ(1-4)F e IRVQ(1-4)R es adecuada para la detección temprana en muestras de suero que proceden de pacientes sospechosos de padecer dengue.